Pato 96 Wells/Kit Sensitivity da carne de porco da galinha de Olaquindox ELISA Diagnostic Method Test For 0,2 Ppb

Olaquindox ELISA Test Kit para o pato 96 Wells/Kit Sensitivity da carne de porco da galinha 0,2 ppb

 

1. Princípio

Este jogo do teste é baseado no immunoassay competitivo da enzima para o ofOlaquindox da detecção na amostra. Os antígenos de acoplamento são pré-revestidos nas micro-bem listras. TheOlaquindox na amostra e os antígenos de acoplamento pré-revestidos nas micro-bem listras competem para o anti-Olaquindox anticorpo. Depois que a adição do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é adicionada para a coloração. O valor da densidade ótica (OD) da amostra tem uma correlação negativa com o Olaquindox nele. Este valor é comparado à curva padrão e a concentração de Olaquindox é obtida subseqüentemente.

2. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0,2 ppb
Temperatura da incubadora: 37℃
Tempo da incubadora: 30min~30min~15min

Limite de detecção:
Carne de porco, ppb da galinha 0,2
Ppb suíno do fígado 1
Alimentação 20ppb

Taxa da reação cruzada:
Olaquindox100%
Carbadox<7>

Taxa de recuperação:
Tissue95%±25%
Feed70%±20%

3. Componentes

 

1	Micro-bem tiras	12 tiras com os 8 removíveis poços cada
2	solução 6× padrão (1 mL cada um)	0ppb	0.2ppb
		0.6ppb	1.8ppb
		5.4ppb	16.2ppb
3	Conjugado da enzima	12ml	tampão vermelho
4	Solução de funcionamento do anticorpo	7ml	tampão azul
5	Carcaça A	7ml	tampão branco
6	SubstrateB	7ml	tampão preto
7	Pare a solução	7ml	tampão amarelo
8	20× concentrou o amortecedor de lavagem	40ml	tampão branco
9	2× concentrou redissolving a solução	50ml	tampão transparente

 

4. Materiais exigidos mas não fornecidos

1) Equipamentos: o leitor do microplate (450nm/630nm), homogenizador, oscilador, centrifugador, medindo introduz com pipeta, dispositivo da nitrogênio-secagem e equilíbrio (uma sensibilidade recíproca de 0,01 g), incubadora.
2) Micropipettors: monocanal 20 a 200µL e 100 a 1000µL e a multi-canal 30~300µl;
3) Reagentes: Acetonitrilo, N-hexano, Al2O3

5. Pré-tratamento da amostra

Instruções
Os seguintes pontos devem ser tratados antes do pré-tratamento do tipo da amostra:
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve ser verificado para estar limpo e deve re-ser limpado caso necessário, a fim evitar a contaminação que interfere com os resultados experimentais.

Preparação da amostra
1) Solução de Sampleredissolving: Dilute2× concentrou redissolving a solução com água deionized no 1:1

5.1Tissues (galinha, carne de porco/fígado)
1. tome 2± 0.05g da amostra homogeneizada no tubo de centrifugador 50ml, add10mLAcetonitrile (sem água), agitam corretamente for2min. Centrifugador em above4000r/minuto na temperatura ambiente (20 - 25℃) para 10min.
2. supernatant, sopro a secar com nitrogênio ou ar de Take5mL em 56℃.
3. dissolva o residuesin seco 2mlN-hexane, add1mL da solução redissolving diluída, mixthoroughly para 30s, centrifugador em above4000r/minuto na temperatura ambiente (20-25℃) for5min. Remova a fase do acima-layerN-hexano.
4. tome a 50 o µL para a análise.
Dobra da diluição da amostra: 1

5.2Feed
1. pese 1± 0,05 g homogeneizou a amostra no tubo de centrifugador, adicionam 2gAl2O3, a seguir 5mlAcetonitrile, shakeviolently for3min, centrifugador em above4000r/minuto em 25℃ for5min;
2. Take50ulsupernatant, mistura com 950ul diluiu redissolving solutionevenly, toma o líquido da acima-camada 50µL para a análise.
Dobra da diluição da amostra: 100

6. Procedimentos de ELISA

6,1 instruções
1) Traga todos os reagentes e micro-bem tiras à temperatura ambiente (20-25℃) antes de usar;
2) Retorne todos os reagentes a 2-8℃ imediatamente depois do uso;
3) A reprodutibilidade da análise de ELISA, em grande parte, depende da consistência da lavagem da placa. A operação correta do lavagem da placa é o ponto-chave nos procedimentos de ELISA;
4) Para a incubação em temperaturas constantes, todas as amostras e reagentes devem evitar a exposição à luz, e cada microplate deve ser selado pela membrana da tampa.

 

6,2 procedimento de funcionamento
1) Remova todos os reagentes exigidos e mantenha-os na temperatura ambiente (20-25℃) no mínimo 30min. Note que cada reagente deve ser agitado e misturado bem antes de usar;
2) Tome o quadro desejado da tira e da placa do microwell. Os microplates não utilizados devem ser resealed e armazenado em 2-8°C;
3) Preparação da solução: Os 40 mL diluídos de 20× concentraram o amortecedor de lavagem com água deionized no 1:19 (de 1 partes do amortecedor concentrado 20× da lavagem + 19 porções da água deionized), ou preparam-se como necessário;
4) Numeração: Numere os microwells de acordo com as amostras e as soluções padrão; cada amostra e solução padrão devem ser feitas em duplicado; grave suas posições;
5) Adicione o µL 50 da amostra ou da solução padrão para separar poços, e adicione então o µL 50 da solução de trabalho do anticorpo a cada poço. Agite delicadamente para misturar bem, cubra o microplate com um filme da tampa, e incube-o em 37°C para o minuto 30;
6) Lave o microplate 4-5 vezes com os 250 µL/well do amortecedor de lavagem; embeba os poços no amortecedor de lavagem por 15-30 segundos, e a pancadinha seca com o papel absorvente (se alguma bolha de ar é encontrada após a batida, eliminada com uma ponta limpa da pipeta));
7) Adicione o µL 100 do conjugado da enzima a cada poço, agitação e mistura delicadamente, tampa o microplate com um filme da tampa, e incube-o em 37°C para o minuto 30; derrame para fora o líquido do poço, lave o microplate com amortecedor da lavagem, e continue a pisar 6).
8) Desenvolvimento da cor: Adicione o µL 50 o µL da solução da carcaça A e 50 da solução de B a cada poço. Agite delicadamente e mistura, e incube em 37°C por 15 minutos na obscuridade para o desenvolvimento da cor;
9) Ensaio: Adicione o µL 50 da solução da parada a cada poço. Agite delicadamente para misturar. Ajuste o comprimento de onda do leitor do microplate a 450nm para determinar o valor do OD. (Se recomenda ler o valor do OD no comprimento de onda duplo 450/630nm dentro de 5 minutos).

 

7. Julgamento do resultado

Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento áspero, quando o segundo for a determinação quantitativa. Nota que o valor do OD da amostra tem uma correlação negativa com o ofOlaquindox satisfeito.

7,1 determinação qualitativa
A escala de concentração (ng/mL) pode ser obtida da comparação o valor médio do OD da amostra com o aquele da solução padrão. Supor que o valor do OD da amostraⅠ é 0,3, e aquela do Ⅱ da amostra são 1,0, quando aquelas das soluções padrão forem como os followings: 2,243 para 0ppb, 1,816 for0.2ppb, 1,415 for0.6ppb, 0,74 for1.8ppb, 0,313 for5.4ppb e 0,155 for16.2ppb, em conformidade a escala de concentração do Ⅰ is5.4 to16.2ppb da amostra, e aquela do Ⅱ is0.6 da amostra a 1.8ppb.

7,2 determinação quantitativa
Os valores médios dos valores da absorvência são equivalentes à porcentagem do valor médio do OD (b) da amostra e da solução padrão divididas pelo valor do OD (B0) da primeira solução padrão (0 padrões) e multiplicadas subseqüentemente em 100%, isto é,

 

Porcentagem do valor da absorvência =	B	×100%
	B0

 

Valor do OD da média de B-the (poços dobro) da amostra ou da solução padrão
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padrão de ng/mL
Tire a curva padrão com as porcentagens da absorção das soluções padrão e os valores do semilogarithm das soluções padrão de Olaquindox (ng/mL) como o y e a X-linha central, respectivamente. Leia a concentração correspondente da amostra da curva padrão incorporando sua porcentagem da absorção na curva padrão. O valor resultante é multiplicado subseqüentemente pela dobra correspondente da diluição, assim finalmente obtendo a concentração de Olaquindox na amostra.
Usar o software de análise profissional deste jogo será mais conveniente para a análise exata e rápida de uma grande quantidade de amostras. (Nos contacte por favor para este software)

8. Precauções

1. A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos reagentes e das amostras que não estão sendo retornados à temperatura ambiente (℃ 20-25) conduzirão a um valor padrão mais baixo do OD
2. a seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das situações que incluem as curvas padrão não-lineares e a reprodutibilidade indesejável
3. a mistura cada reagente e mistura de reação uniformemente e para lavar completamente o microplate, se não lá será a reprodutibilidade indesejável
4. A solução da parada é a solução ácida sulfúrica de 2 M, evita contactar com a pele;
5. põe o microplate não utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substância padrão e a cor incolor anteriores são sensíveis à luz, e assim não pode diretamente ser exposta à luz
6. Não use o jogo que excede sua data de expiração. O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá às mudanças na sensibilidade e nos valores de detecção do OD. Não troque os reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se
7. rejeite a solução da coloração com toda a cor que indicar a degeneração desta solução. O valor de detecção das 0 soluções padrão de menos de 0,5 indica sua degeneração
8. A temperatura a melhor da reação é o ℃ 37, e as temperaturas demasiado altas ou demasiado baixas conduzirão às mudanças na sensibilidade de detecção e em valores do OD.

9. Data do armazenamento e de expiração

Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado.
Data de expiração: 12 meses; a data da produção está na caixa.
Nota: Se o pacote do vácuo do microplate tem o escapamento, é ainda válido usar-se, não afeta o resultado da análise, seja relaxar para usar-se.

 

 

 

 

 

Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de 7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)

 

Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos personalizados.

 

Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso processo de produção conforma-se aos procedimentos padrão para assegurar a qualidade de produto a melhor.

 

Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientação cara-a-cara através do vídeo, do telefone, etc.

 

Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.

 

Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de acordo com suas exigências.