Metronidazole ELISA Antibody Fast Detection Kit para o mel 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 Ppb

Metronidazole ELISA Test Kit para o mel 96 Wells/Kit Sensitivity 0,05 ppb

 

1. Princípio

Este jogo do teste é baseado no immunoassay competitivo da enzima para a detecção de Metronidazole na amostra. Os antígenos de acoplamento são pré-revestidos nas micro-bem listras. O Metronidazole na amostra e os antígenos de acoplamento pré-revestidos nas micro-bem listras competem para os anti anticorpos de Metronidazole. Depois que a adição do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é adicionada para a coloração. O valor da densidade ótica (OD) da amostra tem uma correlação negativa com o Metronidazole nele. Este valor é comparado à curva padrão e a concentração de Metronidazole é obtida subseqüentemente.

2. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0.05ppb
Limite de detecção
Mel: sobre 0.1ppb
Nota: ppb= ng/ml ou ng/g

Taxa da reação cruzada:
Metronidazole 100%
Ornidazole 83%
Secnidazole 110%
Metronidazole-OH <1> Tinidazole <1> Dimetridazole <1>

Taxa de recuperação: 90±30%
 

3. Componentes

 

1	Micro-bem tiras	12 tiras com os 8 removíveis poços cada
2	solução 6× padrão (1mL cada um)	0 ppb	0,05 ppb
		0,15 ppb	0,45 ppb
		ppb 1,35	ppb 4,05
3	Conjugado da enzima	12 ml	tampão vermelho
4	Solução de funcionamento do anticorpo	7 ml	tampão azul
5	Carcaça A	7 ml	tampão branco
6	SubstrateB	7 ml	tampão preto
7	Pare a solução	7 ml	tampão amarelo
8	20× concentrou o amortecedor de lavagem	30 ml	tampão branco
9	Redissolving a solução	50 ml	tampão transparente

 

4. Materiais exigidos mas não fornecidos

1) Equipamentos: o leitor do microplate (450nm, 630nm), impressora, dispositivo da nitrogênio-secagem, redemoinho, abanador, centrifugador (3000g e acima), medindo introduz com pipeta, o equilíbrio (uma sensibilidade recíproca de 0,01 g), incubadora (4℃, 25℃), banho maria, temporizador;
2) Micropipettors: µL 20-200, 100-1000 µL do monocanal, e µl do oito-canal 30~300;
3) Reagentes (AR): Na2HPO412H2O▪, NaH2PO4·2H2O, acetato de etilo, hexano, água deionized.

5. Pré-tratamento da amostra

Instruções
Os seguintes pontos devem ser tratados antes do pré-tratamento do tipo da amostra:
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada equipamento experimental deve estar limpo e deve re-ser limpado caso necessário, a fim evitar a contaminação que interfere com os resultados experimentais.

Preparação da solução antes do pré-tratamento da amostra:
1) Amortecedor de lavagem: 20× de 1 partes concentrou o amortecedor de lavagem + 19 porções da água deionized.
2) amortecedor de 0.2M Phosphate: pese 25.8g Na2HPO412H2O▪, 4.350g NaH2PO4·2H2O, adicionam 500ml deionized a água para dissolver-se completamente.
 

5,1 preparação da amostra
Mel
1) Pese a amostra do mel de 2.0± 0.05g no tubo de centrifugador 50ml plástico;
2) Adicione o amortecedor de 2ml 0.2M Phosphate, a seguir adicione o acetato de etilo 8ml, agitação fortemente para 5min (ou use o redemoinho para 3min) para fazer completamente o contato da amostra com fase orgânica;
3) Centrifugador acima em 3000 g na temperatura ambiente para 5min;
4) Líquido claro da acima-camada de transferência 4ml no tubo de centrifugador 5ml (nota: não tome a fase da água da para baixo-camada), sopro para secar no banho maria 50-60℃;
5) Adicione o hexano 1ml e o 0.5ml que Redissolving a solução em conformidade, agite-os fortemente para 2min (ou use o redemoinho para 1min);
6) Centrifugador acima em 3000 g na temperatura ambiente para 5min;
7) Rejeite a fase orgânica da acima-camada, tome o líquido da para baixo-camada 50ul para testar.
Dobra da diluição da amostra: 0,5

6. Procedimentos de ELISA

6,1 instruções
1) Traga todos os reagentes e micro-bem tiras à temperatura ambiente (℃ 20-25) antes de usar;
2) Retorne todos os reagentes ao ℃ 2-8 imediatamente depois do uso;
3) A reprodutibilidade da análise de ELISA, em grande parte, depende da consistência da lavagem da placa. A operação correta do lavagem da placa é o ponto-chave em ELISA os procedimentos;
4) Para a incubação em temperaturas constantes, todas as amostras e reagentes devem evitar a exposição à luz, e cada microplate deve ser selado pela membrana da tampa.

6,2 procedimentos da operação
1. traga o jogo do teste ao minuto 30 da temperatura ambiente (℃ 20-25) no mínimo, notam que cada reagente deve ser agitado para misturar uniformemente antes de usar, põem as micro-bem tiras exigidas em quadros da placa. Re-selou o microplate não utilizado, loja no ℃ 2-8, não congelado.
2. numeração: número os micro-poços de acordo com amostras e a solução padrão; cada amostra e solução padrão devem ser executadas em duplicado, gravam suas posições.
3. adicione o µL 50 da amostra ou da solução padrão em poços duplicados separados; adicione então 50 o µL da solução de funcionamento do anticorpo em cada poço, mistura delicadamente agitando a placa manualmente. Sele o microplate com a membrana da tampa, e incube-o no ℃ 4 para 60min na obscuridade.
4. derrame líquido fora do microwell, adicione 250 µL/well do amortecedor de lavagem para lavar o microplate para 15-30 s, então derrame o amortecedor de lavagem fora do microwell, adicione o amortecedor de lavagem para lavar desta maneira por 3-4 vezes, tome-o então para fora e bata-o para secar com papel absorvente.
5. adicione o conjugado da enzima 100ul (não põe o microplate na temperatura ambiente por muitos tempos após a etapa de lavagem evitar a seca da ligação do microplate à diferença do resultado), mistura delicadamente agitando a placa manualmente. Sele o microplate com a membrana da tampa, e incube-o no ℃ 25 para 20min na obscuridade. Lavagem como etapa 4.
6. coloração: adicione a mistura 100ul da solução da carcaça A e da solução da carcaça B em cada poço (nota: a solução da carcaça A da mistura e a solução da carcaça B no 1:1, usam a mistura em 10min, não usam o metal para conter ou agitar, evitar a carcaça inválida). Misture delicadamente agitando a placa manualmente, selo que o microplate com a membrana da tampa incuba então no ℃ 25 para o minuto 15 na obscuridade para a coloração.
7. determinação: adicione 50 que o µL do para a solução em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente. Parada com sucesso quando cor da carcaça do azul a amarelar. Recomende ler o valor do OD no duplo-comprimento de onda 450/630 de nanômetro dentro de 5 minutos.

 

7. Julgamento do resultado

Há dois métodos para julgar os resultados: primeiro é o julgamento áspero, quando o segundo for a determinação quantitativa. Nota que o valor do OD da amostra tem uma correlação negativa com a concentração de Metronidazole.

7,1 determinação qualitativa
A escala de concentração (ng/mL) de Metronidazole pode ser obtida de comparar o valor médio do OD da amostra com o aquele da solução padrão. Supor que o valor do OD da amostraⅠ é 0,3, e aquele do Ⅱ da amostra é 1,0, o valor do OD de soluções padrão é: 2,243 para 0ppb, 1,816 para 0.05ppb, 1,415 para 0.15ppb, 0,74 para 0.45ppb, 0,313 para 1.35ppb, 0,155 para 4.05ppb, em conformidade a escala de concentração do Ⅰ da amostra são 1,35 a 4.05ppb, e aquele do Ⅱ da amostra é 0,05 a 0.45ppb.

7,2 determinação quantitativa
Os valores médios dos valores da absorvência são obtidos para o valor médio do OD (b) da amostra e da solução padrão divididas pelo valor do OD (B0) da primeira solução padrão (0 padrões) e multiplicadas subseqüentemente em 100%, isto é,

 

Porcentagem do valor da absorvência =	B	×100%
	B0

 

Valor do OD da média de B-the da amostra ou da solução padrão
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padrão de ng/mL
Tire a curva padrão com as porcentagens da absorção da solução padrão e os valores do semilogarithm da solução padrão de Metronidazole (ng/mL) como o y e a X-linha central, respectivamente. Leia a concentração correspondente da amostra da curva padrão incorporando sua porcentagem da absorção na curva padrão. O valor resultante é multiplicado subseqüentemente pela dobra correspondente da diluição, obtendo finalmente a concentração de Metronidazole na amostra.
Usar o software de análise profissional deste jogo será mais conveniente para a análise exata e rápida de uma grande quantidade de amostras. (Nos contacte por favor para este software).

8. Precauções

1. A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos reagentes e das amostras que não estão sendo retornados à temperatura ambiente (℃ 20-25) conduzirão a um valor padrão mais baixo do OD.
2. a seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das situações que incluem as curvas padrão não-lineares e a reprodutibilidade indesejável; Continue assim ao passo seguinte imediatamente depois da lavagem.
3. a mistura uniformemente, se não lá será a reprodutibilidade indesejável.
4. A solução da parada é a solução ácida sulfúrica de 2 M, evita contactar com a pele.
5. Não use o jogo que excede sua data de expiração. O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá às mudanças na sensibilidade e nos valores de detecção do OD. Não troque os reagentes dos jogos de lotes diferentes para usar-se.
6. põe o microplate não utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A solução padrão e a cor incolor anteriores são sensíveis à luz, e assim não pode diretamente ser exposta à luz.
7. rejeite a solução da coloração com toda a cor que indicar a degeneração desta solução. O valor de detecção da solução padrão 1 (0 ppb) de menos de 0,5 indica sua degeneração.

9. Data do armazenamento e de expiração

Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado.
Data de expiração: 12 meses; a data da produção está na caixa.

 

 

 

 

 

 

Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de 7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)

 

Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos personalizados.

 

Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso processo de produção conforma-se aos procedimentos padrão para assegurar a qualidade de produto a melhor.

 

Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientação cara-a-cara através do vídeo, do telefone, etc.

 

Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.

 

Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de acordo com suas exigências.