Carne de porco 96 Wells/jogo da galinha do teste do soro de Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine

Carne de porco 96 Wells/jogo da galinha do soro de Beta Agonist ELISA Kit For Milk Egg Urine

 

1. Princípio

Os β-agonistas testam o jogo são baseados no immunoassay competitivo da enzima para a detecção de β-agonistas na amostra. O antígeno de acoplamento é pré-revestido nas micro-bem listras. Os β-agonistas na amostra e nos antígenos de acoplamento pré-revestidos nas micro-bem listras competem para os anticorpos dos anti-β-agonistas. Depois que a adição do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é adicionada para a coloração. O valor da densidade ótica (OD) da amostra tem uma correlação negativa com os β-agonistas na amostra. Este valor é comparado à curva padrão e os resíduos dos β-agonistas são obtidos subseqüentemente.

 

2. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0,1 ppb
Temperatura da incubação: 25℃
Tempo da incubação: 30min~15min

Limite de detecção:
Urina suíno 0.3ppb
Carne de porco 0.6ppb

Taxa da reação cruzada: Clenbuterol 100%, Cimaterol <4>

Taxa de recuperação:
Urina suíno, carne de porco 90%±30%

 

3. Componentes

 

1	Micro-bem tiras	12 tiras com os 8 removíveis poços cada
2	solução 6× padrão (1 mL cada um)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Conjugado da enzima	7ml	tampão vermelho
4	Solução de funcionamento do anticorpo	10ml	tampão azul
5	Carcaça A	7ml	tampão branco
6	SubstrateB	7ml	tampão preto
7	Pare a solução	7ml	tampão amarelo
8	20× concentrou o amortecedor de lavagem	40ml	tampão branco
9	amostra 5× que extrai a solução	50ml	tampão transparente

 

4. Materiais exigidos mas não fornecidos

1) Equipamentos: o leitor do microplate, impressora, homogenizador, redemoinho, oscilador, centrifugador, incubadora, medindo introduz com pipeta, equilíbrio (uma sensibilidade recíproca de 0,01 g)
2) Micropipettors: monocanal 20-200µL, 100-1000µL, e multi-canal 30-300µL;
3) Reagentes: NaOH, HCI.

 

5. Pré-tratamento da amostra

Instruções (os seguintes pontos devem ser tratados antes do pré-tratamento)
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve estar limpo e deve re-ser limpado caso necessário, a fim evitar a contaminação que interfere com os resultados experimentais.

Preparação da solução antes do pré-tratamento da amostra:
1) 0.2M HCI: dissolva 17.2mL HCI na água deionized a 1L.
2) NaOH de 1M: dissolva NaOH 4g na água deionized a 100 mL.
3) Amostra que extrai a solução: A amostra 5X de 1 partes que extrai a solução + 4 porções deionized a água, mistura uniformemente.

5,1 urina suíno
Tome a 20 o µL urina clara, detecte-o diretamente (se a urina é enlameada, deve filtrar ou centrifugador em 4000 r/min para o minuto 10, tomam então a urina clara). Loja no ambiente congelado se não use.
Dobra da diluição da amostra: 1

5,2 carne de porco
1. pese 2±0.05g homogeneizou a amostra de tecido em um tubo de centrifugador 50ml, adicionam 3ml 0.2M HCl, agitação para 3 mínimos.
2. Adicione então a solução do NaOH de 600ul 1M e a amostra 2.4ml que extraem a solução, agitação para 3min, centrifugador em 4000 r/min na temperatura ambiente (℃ 20-25) para 10 mínimos.
3. tome o líquido da acima-camada 20µL para a análise. (Nota: se há uma camada gorda após o centrifugador, remova a camada gorda ou a camada gorda separada, toma o líquido claro para a análise)
Dobra da diluição da amostra: 4

 

6. Procedimentos de ELISA

6.1Instructions
1. traga todos os reagentes e micro-bem tiras à temperatura ambiente (℃ 20-25) antes de usar;
2. retorno todos os reagentes ao ℃ 2-8 imediatamente depois do uso;
3. A reprodutibilidade da análise de ELISA, em grande parte, depende da consistência da lavagem da placa. A operação correta do lavagem da placa é o ponto-chave em ELISA os procedimentos;
4. Para a incubação em temperaturas constantes, todas as amostras e reagentes devem evitar a exposição à luz, e cada microplate deve ser selado pela membrana da tampa.

procedimentos 6.2Operation
1. traga o jogo do teste ao minuto 30 da temperatura ambiente (℃ 20-25) no mínimo, notam que cada reagente deve ser agitado uniformemente antes de usar;
2. põe as micro-bem tiras exigidas em quadros da placa. Re-selou o microplate não utilizado, armazenado no ℃ 2-8, não congelado.
3. dilua o amortecedor concentrado 20X da lavagem 40ml no 1:19 com água deionized (20X de 1 partes concentrou o amortecedor de lavagem + água deionized de 19 partes). Ou prepare como a quantidade necessária.
4. numeração: número os micro-poços de acordo com amostras e a solução padrão; cada amostra e solução padrão devem ser executadas em duplicado; grave suas posições.
5. adicione 20µL da amostra ou da solução padrão em poços duplicados separados, a seguir adicione o conjugado da enzima, 50ul/well; adicione então a solução de funcionamento do anticorpo, 80µL/well. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, selo o microplate com a membrana da tampa, incube no ℃ 25 para 30 mínimos.
6. derrame líquido fora do microwell, adicione 250µL/well do amortecedor de lavagem, lavagem por 4-5 vezes, 15-30s cada vez, a seguir remova-o e bata-o para secar com papel absorvente (se há as bolhas após bater, cortam-nas com as pontas limpas).
7. coloração: adicione 50µL da carcaça A, a seguir adicione 50µL a carcaça B em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, e incube no ℃ 25 para o minin 15 o escuro para a coloração.
8. determinação: adicione 50µL do param a solução em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente. Ajuste o comprimento de onda do leitor do microplate em 450nm para determinar o valor do OD de cada poço. (Recomende ler o valor do OD no duplo-comprimento de onda 450/630nm dentro do minuto 5).

 

7. Julgamento do resultado

Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento áspero, quando o segundo for a determinação quantitativa. Nota que o valor do OD da amostra tem uma correlação negativa com concentração dos β-agonistas na amostra.

7,1 determinação qualitativa
A escala de concentração (ng/mL) obteve de comparar o valor médio do OD da amostra com o aquele da solução padrão. Supor que o valor do OD da amostraⅠ é 0,3, e aquele do Ⅱ da amostra é 1,0, o valor do OD de soluções padrão é: 2,243 para 0ppb, 1,816 para 0.1ppb, 1,415 para 0.3ppb, 0,74 para 0.9ppb, 0,313 para 2.7ppb, 0,155 para 8.1ppb, em conformidade a escala de concentração do Ⅰ da amostra são 2,7 a 8.1ppb, e aquele do Ⅱ da amostra é 0,3 a 0.9ppb.

7,2 determinação quantitativa
Os valores médios dos valores da absorvência obtidos para o valor médio do OD (b) da amostra e da solução padrão divididas pelo valor do OD (B0) da primeira solução padrão (0 padrões) e multiplicadas subseqüentemente em 100%, de que são

 

Porcentagem do valor da absorvência =	B	×100%
	B0

 

Valor do OD da média de B-the (poços dobro) da amostra ou da solução padrão
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padrão de ng/mL
Tire a curva padrão com as porcentagens da absorção de soluções padrão e os valores do semilogarithm das soluções padrão dos β-agonistas (ng/mL) como o y e a X-linha central, respectivamente. Leia a concentração correspondente da amostra da curva padrão incorporando sua porcentagem da absorção na curva padrão. O valor resultante é multiplicado subseqüentemente pela dobra da diluição, obtendo finalmente a concentração dos β-agonistas na amostra.

 

8. Precauções

a temperatura ambiente 1.The abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos reagentes e das amostras que não estão sendo retornados à temperatura ambiente (℃ 20-25) conduzirão a um valor padrão mais baixo do OD.
2.Dryness do microplate no processo de lavagem será acompanhado das situações que incluem as curvas padrão não-lineares e a reprodutibilidade indesejável; Continue assim ao passo seguinte imediatamente depois da lavagem.
3.Mix uniformemente, se não lá será a reprodutibilidade indesejável.
a solução da parada 4.The é a solução ácida sulfúrica de 2 M, evita contactar com a pele.
5. Não use o jogo que excede sua data de expiração. O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá às mudanças na sensibilidade e nos valores de detecção do OD. Não troque os reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se.
6. põe o microplate não utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substância padrão e a cor incolor anteriores são sensíveis à luz, e assim não pode diretamente ser exposta à luz.
7. rejeite a solução da coloração com toda a cor que indicar a degeneração desta solução. O valor de detecção das 0 soluções padrão (0 ppb) de menos de 0,5 indica sua degeneração.
8. A temperatura a melhor da reação é o ℃ 25, e as temperaturas demasiado altas ou demasiado baixas conduzirão às mudanças na sensibilidade de detecção e em valores do OD.

 

9. Data do armazenamento e de expiração

Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado.
Data de expiração: 12 meses; a data da produção está na caixa.
Observações: Se o pacote do vácuo de placas de microtiter tem o escapamento, a placa de microtiter é normal e eficaz, não afete o resultado experimental. Sinta por favor livre para usar-se.

 

 

 

 

 

Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de 7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)

 

Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos personalizados.

 

Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso processo de produção conforma-se aos procedimentos padrão para assegurar a qualidade de produto a melhor.

 

Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientação cara-a-cara através do vídeo, do telefone, etc.

 

Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.

 

Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de acordo com suas exigências.