Teste rápido Kit For Feed Grain 96 Wells/Kit Sensitivity do Ochratoxin A do Mycotoxin 0,1 Ppb

Ochratoxin ELISA Test Kit para a grão de alimentação 96 Wells/Kit Sensitivity 0,1 ppb

1. Princípio e uso

O Ochratoxin é um metabolito secundário produzido por determinada espécie do gênero aspergilo e Penicillium. Entre eles, o ochratoxin A é distribuído o mais extensamente na natureza e tem a toxicidade a mais forte, e tem o grande impacto em seres humanos, em animais e em plantas.
O jogo usa ELISA competitivo indireto para detectar o ochratoxin (Ochratoxins A, OTA) nos cereais e nas amostras da alimentação tais como macarronetes de arroz, amendoins, e feijões de soja. O jogo consiste na placa do antígeno e conjugado pré-revestido da enzima, anticorpos, padrões e outros reagentes de apoio. Durante o teste, a solução do padrão ou da amostra é adicionada, o ochratoxin na amostra e o antígeno pré-revestido na placa para competir contra o anticorpo do ochratoxin, e após ter adicionado o conjugado da enzima, através da cor da mostra da carcaça de TMB, os valores da absorvência da amostra do Ochratoxin têm uma correlação negativa com seu índice, comparado com a curva padrão e multiplicado então pela correspondência o fator da diluição, pode tirar o índice do Ochratoxin nas amostras.

2. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0.1ppb (ng/ml)

Incubação: 37℃, 30min~30min~15min

Limite de detecção:
Grão 1ppb
Alimentação 2ppb

Taxa da reação cruzada
Ochratoxin A 100%

Taxa de recuperação:
Grão, alimentação 85±15%

3. Componentes

4. Materiais exigidos mas não fornecidos

1) Equipamento: Leitor de ELISA (450nm/630nm), impressora, redemoinho (abanador opcional), centrifugador, equilíbrio: 0.01g quantidade sensível, pipeta graduadas, homogenizador;
2) Micropipettes: monocanal 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, multi-canal 300ml.
3) Reagentes: Metanol, ₃ de NaHCO, água Deionized.

5. Pré-tratamento da amostra

5,1 preparação da solução antes do pré-tratamento da amostra:
1) 70%Methanol
7 porções do metanol + 3 porções da água deionized;
2) solução do ₃ de 0.1M NaHCO
Pese o ₃ de 4.2g NaHCO, adicione a água deionized para dissolver-se a 500ml;
3) Amortecedor de lavagem
De 1 partes de 20X concentrou o amortecedor de lavagem e para dissolver-se com 19 porções da água deionized para obter o amortecedor de lavagem pronto para uso.

5,2 ofGrain da preparação (arroz, milho, painço etc.)
1) Pese a amostra 2g homogênea em um tubo de centrifugador 50ml, adicione o metanol de 10ml 70%, agitação para 5min, centrifugador em 4000 r/min na temperatura ambiente para 10min;
2) Tome o líquido claro da acima-camada 1ml, adicione a solução do ₃ de 1ml 0.1M NaHCO, agite-à uniformemente;
3) Tome 50ul líquido para testar
Fator da diluição: Limite de detecção 10: 1ppb

5,3 preparação da alimentação
1) Pese a amostra 2g homogênea em um tubo de centrifugador 50ml, adicione o metanol de 20ml 70%, agitação para 5min, centrifugador em 4000 r/min na temperatura ambiente para 10min;
2) Tome o líquido claro da acima-camada 1ml, adicione a solução do ₃ de 1ml 0.1M NaHCO, agite-à uniformemente;
3) Tome 50ul líquido para testar
Fator da diluição: Limite de detecção 20: 2ppb

6. Procedimentos de ELISA

1) Traga o jogo do teste ao minuto 30 da temperatura ambiente (℃ 20-25) no mínimo, o amortecedor de lavagem concentrado 20X pode ter a cristalização quando loja no frio, necessidade de retornar à temperatura ambiente para dissolver-se completamente; note que cada reagente deve ser agitado uniformemente antes de usar; Põe as micro-bem tiras exigidas em quadros da placa. Re-selo o microplate não utilizado, loja no ℃ 2-8, não congelado.
2) Numeração: número os micro-poços de acordo com amostras e a solução padrão; cada amostra e solução padrão devem ser executadas em duplicado; grave suas posições.
3) Adicione o padrão/amostra: Adicione o µL 50 da amostra ou a solução padrão em poços duplicados separados, a seguir adicione a solução de funcionamento do anticorpo, 50µL/well. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, selo o microplate com a membrana da tampa, incube em 37℃ para o minuto 30 na obscuridade.
4) Microplate da lavagem: Abra com cuidado o membrance da tampa, derramam o líquido fora do microwell; adicione 350 µL/well do amortecedor da lavagem, lave-os inteiramente por 5 vezes, 30s cada vez, a seguir remova-os e bata-os para secar com papel absorvente. (Use lança não utilizada para perfurar a bolha após seco)
5) Adicione o conjugado da enzima: adicione o conjugado da enzima, 100 µL/well. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, selo o microplate com a membrana da tampa, incube no minuto de 37℃ for30 na obscuridade.
Lavagem como a etapa 4).
6) Coloração: adicione o µL 50 da carcaça A então a carcaça B de 50 µL em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, andincubate em 37℃ para o minin 15 o escuro para a coloração. (Se a cor azul é demasiado clara, o tempo de reação pode ser prolongado apropriadamente)
7) Determinação: adicione 50 que o µL do para a solução em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente. Ajuste o comprimento de onda do leitor do microplate em 450nm para determinar o valor do OD de cada poço. (Recomende ler o valor do OD no duplo-comprimento de onda 450/630nm dentro do minuto 10).

7. Julgamento do resultado

A fim calcular a concentração de amostras, uma curva padrão deve ser feita. Antes que a curva padrão esteja feita, o conceito de % da absorvência deve ser sabido.
Cálculo de % da absorvência:

Valor do OD da média de B-the da amostra ou da solução padrão.
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padrão de ng/mL.
O padrão zero é feito assim igual a 100% e os valores da absorvência são citados nas porcentagens. Os valores calcularam para os padrões são entrados em um sistema de coordenadas no papel de gráfico semilogarithmic contra a concentração do ochratoxin A [μg/kg]. A concentração do ochratoxin A em μg/kg (ppb) que corresponde à absorvência de cada amostra pode ser lida da curva de calibração.
Um software especial para a análise do resultado de ELISA facilitará determinações dobro ou múltiplas. Se você precisa, chame por favor para pedir.

8. Precauções

1) A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos reagentes e das amostras que não estão sendo retornados à temperatura ambiente (℃ 25) conduzirão a um valor padrão mais baixo do OD.
2) A seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das situações que incluem as curvas padrão não-lineares e a reprodutibilidade indesejável; continue assim ao passo seguinte imediatamente depois da lavagem.
3) Misture uniformemente antes de adicionar algum reagente.
4) A solução da parada é a solução ácida sulfúrica de 2 M, evita contactar com a pele.
5) Não use o jogo que excede sua data de expiração. O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá às mudanças na sensibilidade e nos valores de detecção do OD. Não troque os reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se.
6) Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado. Põe o microplate não utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substância padrão e a cor incolor anteriores são sensíveis à luz, e assim não pode diretamente ser exposta à luz.
7) Rejeite a solução da coloração com toda a cor que indicar a degeneração desta solução. O valor de detecção (450/630nm) das 0 soluções padrão (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0>

9. Data do armazenamento e de expiração

Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado.
Data de expiração: 12 meses; a data da produção está na caixa.

Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de 7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)

Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos personalizados.

Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso processo de produção conforma-se aos procedimentos padrão para assegurar a qualidade de produto a melhor.

Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientação cara-a-cara através do vídeo, do telefone, etc.

Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.

Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de acordo com suas exigências.