tecido 96 Wells/jogo do milho de Elisa Mycotoxin Testing Kits For do amendoim das aflatoxinas 30min

Aflatoxinas totais ELISA Test Kit para o tecido 96 Wells/jogo do amendoim do milho da alimentação

 

1. Princípio de teste dos jogos do Mycotoxin

Este jogo é baseado no immunoassay competitivo indireto da enzima para a detecção de aflatoxinas totais. Os antígenos conjugados são pré-revestidos em tiras do microwell. A aflatoxina na amostra compete com o antígeno conjugado pré-revestido na tira do microwell para anticorpos da anti-aflatoxina. Depois que o conjugado da enzima é adicionado, a carcaça de TMB está adicionada manchando. O valor da densidade ótica (OD) de uma amostra é correlacionado negativamente com a aflatoxina na amostra. Este valor é comparado a uma curva padrão, e o nível residual da aflatoxina é obtido então.

 

2. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0,02 ppb
Temperatura da incubadora: 25℃
Tempo da cultura: 30min~15min
Limite de detecção:
Alimentação, arroz, milho, amendoim, tecido, óleo comestível 2ppb
Taxa de reação transversal:
Aflatoxina B1 100%
Aflatoxina M1 91,2%
Aflatoxina B2 68,4%
Aflatoxina G1 4,7%
Aflatoxina G2 2,7%
Taxa de recuperação:
Alimentação, arroz, milho, amendoim, tecido, óleo comestível 95±35%

 

3. Componentes de teste dos jogos do Mycotoxin

 

1	Micro-bem tiras	12 tiras com os 8 poços removíveis cada
2	solução 6× padrão (1 mL cada um)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Conjugado da enzima	7ml	tampão vermelho
4	Solução de funcionamento do anticorpo	7ml	tampão azul
5	Carcaça A	7ml	tampão branco
6	Carcaça B	7ml	tampão preto
7	Pare a solução	7ml	tampão amarelo
8	20× concentrou o amortecedor de lavagem	40ml	tampão branco
9	20× concentrou redissolving a solução	50ml	tampão transparente

 

4. Preparação da amostra

Instruções para o uso (os seguintes pontos devem ser tratados antes do preprocessing)
1) A experiência pode somente usar pontas descartáveis, e as pontas devem ser substituídas ao aspirar reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve ser limpado e re-limpado caso necessário para evitar a contaminação que interfere com os resultados experimentais.

Preparação da solução antes do pré-tratamento da amostra:
1) Solução da dissolução da amostra
Use 20X de 1 partes concentrou redissolving a solução e para dissolver-se com 19 porções deionized a água para obter uma amostra pronto para uso que redissolving a solução.
2) Extrato de amostra
Use 7 porções do metanol e dissolva-as em 3 porções deionized a água para um extrato de amostra pronto para uso.

Preparação da amostra
4,1 preparação de amostras do tecido, da alimentação, do arroz e do milho
1) 1.0±0.05g postos da amostra à terra em um tubo de centrifugador 50ml, adicionam 5ml do extrato de amostra, agitação para 3min, centrifugador em 20°C para 10min acima de 4000r/min;
2) Tome o supernatant 100ul, adicione a amostra 700ul que redissolving a solução, agite-a bem;
3) Tome 50μl para testar
Fator da diluição: 40

4,2 preparação de amostras do óleo comestível
1) Tome a 1.0±0.05g a amostra do óleo comestível em um tubo de centrifugador 50ml; adicione 5ml do extrato de amostra, a seguir adicione 4ml do n-hexano, agitação para 3min, centrifugador em 4000r/min em 20℃ para 10min;
2) Rejeite o supernatant, tome 100ul da solução média da camada, adicione 700ul da amostra que redissolving a solução, e agite-o bem;
3) Tome 50μl para testar
Fator da diluição: 40

4,3 preparação de amostras do amendoim
1) O amendoim 1.0±0.05g posto esmagou a amostra em um tubo de centrifugador 50ml; adicione 5ml do extrato de amostra, a seguir adicione 4ml do n-hexano, agitação para 3min, centrifugador em 4000r/min acima de 20℃ para 10min;
2) Rejeite o supernatant, tome 100ul da solução média da camada, adicione 400ul da amostra que redissolving a solução, e agite-o bem;
3) Tome 50μl para testar
Fator da diluição: 25

 

5. Procedimentos de ELISA

5,1 instruções para o uso
1) Traga reagentes de ELISA à temperatura ambiente (20 - °C) 25 antes de usar.
2) Põe o reagente de ELISA de volta a 2-8°C imediatamente depois do uso.
3) A reprodutibilidade do processo da análise de ELISA depende pela maior parte da consistência da lavagem da placa, e a operação correta da lavagem da placa é o foco de determinar o procedimento de ELISA.
4) Durante todos os processos de incubação da temperatura constante, evite a luz, e sele o microplate com um filme da tampa.

5,2 procedimentos da operação
1) Traga o jogo do teste ao minuto 30 da temperatura ambiente (℃ 20-25) no mínimo, note que cada reagente deve ser agitado uniformemente antes de usar;
2) Põe as micro-bem tiras exigidas em quadros da placa. Re-selou o microplate não utilizado, armazenado no ℃ 2-8, não congelado.
3) Preparação da solução: tome o amortecedor concentrado 20× da lavagem 40ml, dissolva-o com água deionized no 1:19 (amortecedor concentrado 20× de 1 partes da lavagem + 19 porções da água deionized), ou prepare-o como a quantidade necessária.
4) Numeração: número os micro-poços de acordo com amostras e a solução padrão; cada amostra e solução padrão devem ser executadas em duplicado; grave suas posições.
5) Adicione o padrão/amostra: Adicione o µL 50 da amostra ou a solução padrão em poços duplicados separados, a seguir adicione o conjugado da enzima, 50 µL/well; então solução de funcionamento do anticorpo, 50 µL/well. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, selo o microplate com a membrana da tampa, incube em 25°C para o minuto 30 na obscuridade.
6) Microplate da lavagem: Abra com cuidado o membrance da tampa, derramam o líquido fora do microwell; adicione 250 µL/well do amortecedor da lavagem, lave-os inteiramente por 4-5 vezes, 15-30 s cada vez, a seguir remova-os e bata-os para secar com papel absorvente. (Use lança não utilizada para perfurar a bolha após seco)
7) Coloração: adicione o µL 50 da solução da carcaça A então solução de 50 µL B em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente, andincubate em 25°C para 15min na obscuridade para a coloração.
8) Determinação: adicione 50 que o µL do para a solução em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa manualmente. Ajuste o comprimento de onda do leitor do microplate em 450 nanômetro para determinar o valor do OD de cada poço. (Recomende ler o valor do OD no duplo-comprimento de onda 450/630 de nanômetro dentro do minuto 5).

 

6. Julgamento do resultado

Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento áspero, quando o segundo for a determinação quantitativa. Nota que o valor do OD da amostra tem uma correlação negativa com a aflatoxina total na amostra.

6,1 determinação qualitativa
A escala de concentração (ppb) pode ser obtida pelo comparado o valor médio da absorvência com os padrões. Supõe que valor da absorvência da amostra uma é 0,3, a amostra dois é 1,0, e os padrões são: 0ppb de 2,243; 0.02ppb de 1,816; 0.06ppb de 1,415; 0.18ppb de 0,74; 0.54ppb de 0,313; 1.62ppb de 0,155. Então a concentração da amostra uma está na escala de 0.54ppb ~ 1.62ppb; A amostra dois é 0.06ppb ~ 0.18ppb. A escala de concentração da aflatoxina total nas amostras pode ser obtida pelo multiplicado pela diluição correspondente da amostra.

6. Análise 2 quantitativa
A fim calcular a concentração de amostras, uma curva padrão deve ser feita. Antes que a curva padrão esteja feita, o conceito de % da absorvência deve ser saber.
Cálculo de % da absorvência:

 

Porcentagem do valor da absorvência =	B	×100%
	B0

 

Valor do OD da média de B-the da amostra ou da solução padrão.
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padrão de ng/mL.
O padrão zero é feito assim igual a 100% e os valores da absorvência são citados nas porcentagens. Os valores calcularam para os padrões são entrados em um sistema de coordenadas no papel de gráfico semilogarithmic contra o a concentração total da aflatoxina [ng/L]. A concentração total da aflatoxina em ng/L (ppb) que corresponde à absorvência de cada amostra pode ser lida da curva de calibração.
Um software especial para a análise do resultado de ELISA facilitará determinações dobro ou múltiplas. Se você precisa, chame por favor para pedir.

7. Precauções

1) A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos reagentes e das amostras que não estão sendo retornados à temperatura ambiente (℃ 20-25) conduzirão a um valor padrão mais baixo do OD.
2) A seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das situações que incluem as curvas padrão não-lineares e a reprodutibilidade indesejável; Continue assim ao passo seguinte imediatamente depois da lavagem.
3) Misture uniformemente antes de adicionar algum reagente.
4) A solução da parada é a solução ácida sulfúrica de 2 M, evita contactar com a pele.
5) Não use o jogo que excede sua data de expiração. O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá às mudanças na sensibilidade e nos valores de detecção do OD. Não troque os reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se.
6) Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado. Põe o microplate não utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substância padrão e a cor incolor anteriores são sensíveis à luz, e assim não pode diretamente ser exposta à luz.
7) Rejeite a solução da coloração com toda a cor que indicar a degeneração desta solução. O valor de detecção (450/630nm) das 0 soluções padrão (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8) a temperatura a melhor da reação é o ℃ 25, e as temperaturas demasiado altas ou demasiado baixas conduzirão às mudanças na sensibilidade de detecção e em valores do OD.

8. Data do armazenamento e de expiração

Armazenamento: loja no ℃ 2-8, não congelado.
Data de expiração: 12 meses; a data da produção está na caixa.
Nota: Se o pacote do vácuo do microplate tem o escapamento, é ainda válido usar-se, não afeta o resultado da análise, seja relaxar para usar-se.

 

 

 

 

 

 

Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de 7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)

 

Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos personalizados.

 

Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso processo de produção conforma-se aos procedimentos padrão para assegurar a qualidade de produto a melhor.

 

Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientação cara-a-cara através do vídeo, do telefone, etc.

 

Q5: Que é o método do pagamento?
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