Brucelose ELISA Test Kit veterinária para o cão bovino do porco dos carneiros da cabra

Cão veterinário do porco dos carneiros da cabra de ELISA Test Kit For Bovine da brucelose

 

Anticorpo ELISA Kit da brucelose para o porco dos carneiros da cabra e o cão bovinos 96Wells/Kit

 

1. Introdução

O jogo do anticorpo ELISA da brucelose é usado para testar o anticorpo da brucelose no soro dos Bovídeos, da cabra, dos carneiros, do porco e do cão etc.
Este jogo para usar o método competitivo de ELISA, antígeno da brucelose é pré-revestido em micro-bem tiras da enzima. Ao testar, adicione a amostra diluída do soro, após a incubação, se há anticorpo específico da brucelose, ele combinará com o antígeno pré-revestido, para rejeitar o anticorpo uncombined e outros componentes com lavagem; adicione então o anticorpo monoclonal etiquetado enzima do vírus da anti-brucelose, anticorpo na amostra para obstruir a combinação de anticorpo monoclonal e de antígeno pré-revestido; rejeite o conjugado uncombined da enzima com lavagem; Adicione a carcaça de TMB nos micro-poços, o sinal azul pela catálise da enzima está na proporção inversa de índice do anticorpo na amostra, leitor do uso ELISA no wavelenth 450nm medir a absorvência um valor em poços da reação após ter adicionado a solução da parada para parar a reação.

2. Reagentes e índices

 

Código	Artigo	Especs.	Código	Artigo	Especs.
1	O Brucelose-AG revestiu as placas 96wells	placas de 1/2	7	Pare a solução	15 ml
2	Conjugado da enzima	10/20 de ml	8	Controle negativo	ul 200
3	10X concentrou o amortecedor de lavagem	100 ml	9	Controle positivo	ul 60
4	Carcaça	11/22 de ml	10	Folha adesiva	2/4 de parte
5	Diluente da amostra	100 ml	11	Folha de instrução	1 parte
6	Placa da diluição do soro	partes de 1/2

 

3. O material exigido não forneceu

1) Micropipette: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) Pontas descartáveis da pipeta.
3) Graduado: 500ml.
4) Leitor de Microplate: 96 poços.
5) Água destilada ou água deionized.
6) Arruela de Microplate

4. Preparação da amostra

Tome o sangue inteiro animal, obtêm o soro usando o método regular, o soro se brilhante e nenhuma hemólise.

5. Preparação de lavagem do amortecedor

O retorno 10X concentrou o amortecedor de lavagem na temperatura ambiente antes de usar, se há cristais de sal, agita para fazê-lo dissolvido, então diluído ele em 10 vezes com água destilada ou água deionized. O amortecedor de lavagem diluído pode armazenar em 4℃for aproximadamente 1 semana.

 

 

6. Notas

 

1) Retorne todos os reagentes à temperatura ambiente antes de usar, agite-os bem antes de usar, e loja no depois de uso 2-8°C.
2) Não misture reagentes dos jogos diferentes e dos grupos para impedir que os reagentes estejam contaminados durante o uso.
3) A solução da carcaça e da parada pode ser irritante à pele e os olhos, usam-se por favor com cuidado.
4) Não expõe a carcaça à luz forte e não evite o contato com agentes de oxidação.
5) A Brucella prata-chapeou placas deve ser selada contra a umidade. Retorne placas não utilizadas de MicroWell para secar sacos da folha e para selá-los em 2-8 °C.
6) Todo o desperdício deve ser segurado bem antes da eliminação para evitar a contaminação.
7) Siga restritamente as instruções de funcionamento para os melhores resultados. Introduzir com pipeta, sincronismo e limpeza devem ser precisos durante todo o processo.
8) O Brucelose-AG revestiu placas é descartável, não reutiliza.

7. Procedimento de teste

1) Na placa da diluição do soro, dilua o soro, o controle negativo e o controle positivo no 1:40 (por exemplo: da amostra 195ul + amostra do soro 5ul), e a mistura diluição bem;
2) Tome ao Brucelose-AG placa revestida (aberta e medida a quantidade exigida de acordo com a amostra), adicione o soro diluído aos poços do teste, 20ul/well; ao mesmo tempo, o grupo 1 bem para o controle positivo e 2 poços para o controle negativo, respectivamente em seus poços Add diluíram o controle negativo e o controle positivo diluído, 20ul/well;
3) Adicione o conjugado da enzima, 80ul/well, agite-o delicadamente, cubra-o com o autoadesivo, e incube-o em 37°C por 60 minutos;
4) Abra a folha autoadesiva, derrame para fora o líquido no poço, adicione o amortecedor diluído a cada poço, 250ul/well da lavagem, derrame para fora o líquido, repita as etapas acima 4-6 vezes, e use finalmente o papel absorvente para lançar a tampa para secar;
5) Adicione a carcaça, 100ul/well, misture-a bem, tampa com o autoadesivo, e incube-a em 37°C por 15 minutos na obscuridade;
6) Adicione a solução da parada, 50ul/well para parar a reação, e meça o resultado em 10 minutos.

 

8. Julgamento dos resultados

 

Os poços do controle vazio são ajustados a zero e o valor do OD em 450nm é lido (630nm é a referência).
Para que a detecção trabalhe:
Valor negativo do OD do controle (N)>0.5, quando valor positivo (P) obstruindo rate>80%
Método do cálculo:
PI (taxa de obstrução) = {1 (valor médio do OD do valor do OD da amostra/controle negativo)} x 100%
Interpretação dos resultados
PI (taxa) da oclusão > 70%: positivo
≤ 70% do PI (taxa de obstrução): negativo

9. Armazenamento e para expirar data

Loja em 2~8℃ na obscuridade, nenhuma congelada, data de expiração: 12 meses.

 

Manifestação clínica

As manifestações clínicas desta doença são variáveis. Para pacientes individuais, suas manifestações clínicas podem ser simples, somente mostrando o abcesso local, ou muito complexo, mostrando órgãos múltiplos e os sistemas envolvidos ao mesmo tempo. A brucelose do tipo dos carneiros e do tipo do porco é na maior parte séria, quando os sintomas do tipo bovino forem suaves, e alguns casos não podem ter a febre. A brucelose dos carneiros é a doença a mais comum em China. O curso natural de pacientes não tratados é 3-6 meses (4 meses médios), mas pode ser tão curto quanto 1 mês ou contanto que diversos anos. O curso da doença pode geralmente ser agudo e crônico, e a fase aguda de tipo bovino não é frequentemente óbvia. O período de incubação é 7 a 60 dias, geralmente 2 a 3 semanas, e alguns pacientes desenvolvem a doença diversos meses ou mais após a infecção. A maioria das pessoas contaminadas no laboratório vêm sobre dentro de 10 a 50 dias.

Doenças infecciosas Subacute e agudas

Aproximadamente 10%~30% dos pacientes têm o início repentino. Alguns pacientes têm sintomas prodromal por vários dias, como a fraqueza, a insônia, a baixa febre, a anorexia, a inflamação superior das vias respiratórias, etc. As manifestações clínicas principais na fase aguda são febre, hiperidrose, fadiga, artrite, orquite, etc.

(1) o tipo o mais comum de calor é o tipo do abrandamento. Embora o tipo ondulado esclareça somente 5% a 20%, é a maioria de característica. Sua febre tem uma proliferação de 2 a 3 semanas, seguida em 3 a 5 dias a 2 semanas de nenhum período do calor, e então as elevações do calor outra vez, assim que o ciclo flutua e supõe o tipo ondulado; A maioria de pacientes têm somente 2-3 ondas, e ocasionalmente mais de 10. Outros tipos do calor incluem o tipo irregular e a baixa febre contínua.

(2) a hiperidrose é o sintoma proeminente desta doença, que é mais proeminente do que outras doenças quentes. Frequentemente no tardio e no amanhecer, o calor de repente deixa cair e sua abundantemente. A maioria de pacientes sentem fracos e fracos.

a dor articular (de 3) faz frequentemente pacientes gemer e sentir a dor insuportável. Pode envolver umas ou várias junções, principalmente sacroiliac, anca, joelho, ombro, pulso, cotovelo e outras grandes junções. Na fase aguda, pode ser migratório. A dor é cônica, e os analgésicos gerais são ineficazes. Alguns pacientes têm a vermelhidão e o inchamento comum, e a supuração no lado. O inchamento local tal como a bursite, o tenosynovitis e o periarthritis são igualmente comuns. A dor de músculo é mais comum em ambas as coxas e nádegas, que podem causar a dor espástico.

(4) Testitis é igualmente um dos sintomas característicos da brucelose. É causado pela participação do testículo e do epidídimo. É na maior parte unilateral e pode ser tão grande quanto um ovo de ganso com ternura óbvia.

(5) os sintomas secundários incluem a dor de cabeça, a nevralgia, a hepatoesplenomegalia, o lymphadenopathy, etc. O prurido é relativamente raro.

 

 

 

 

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