Raiva ELISA Test Kit canina 96 Wells do vírus/anticorpo do jogo ISO9001

Anticorpo ELISA Kit do vírus de raiva para o animal de estimação 96 Wells/jogo PBF ISO9001

1. Introdução

O jogo do anticorpo ELISA do vírus de raiva (RBV) é usado para testar o anticorpo do vírus de raiva no soro dos cães, dos gatos etc., usados para avaliar o estado da vacinação da raiva.
Este método do bloco ELISA do uso do jogo, antígeno da raiva é pré-revestido em micro-bem tiras da enzima. Ao testar, adicione a amostra diluída do soro, após a incubação, se há anticorpo específico do vírus de raiva, ele combinará com o antígeno pré-revestido, para rejeitar o anticorpo uncombined e outros componentes com lavagem; adicione então o anticorpo monoclonal etiquetado enzima do vírus antirrábico, anticorpo na amostra para obstruir a combinação de anticorpo monoclonal e de antígeno pré-revestido; rejeite o conjugado uncombined da enzima com lavagem; Adicione a carcaça de TMB nos micro-poços, o sinal azul pela catálise da enzima está na proporção inversa de índice do anticorpo na amostra, leitor do uso ELISA no wavelenth 450nm medir a absorvência um valor em poços da reação após ter adicionado a solução da parada para parar a reação.

2. Reagentes e índices

3. Materialrequired notprovided

1) Micropipette: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) Pontas descartáveis da pipeta.
3) Graduado: 500ml.
4) Leitor de Microplate: 96 poços.
5) Água destilada ou água deionized.
6) Arruela de Microplate

4. Preparação da amostra

Tome o sangue inteiro animal, obtêm o soro usando o método regular, o soro se brilhante e nenhuma hemólise

5. Preparação de lavagem do amortecedor

O retorno 10X concentrou o amortecedor de lavagem na temperatura ambiente antes de usar, se há cristais de sal, agita para fazê-lo dissolvido, então diluído ele em 10 vezes com água destilada ou água deionized. O amortecedor de lavagem diluído pode armazenar em 4℃for aproximadamente 1 semana.

6. Notas

1) Retorne todos os reagentes na temperatura ambiente antes de usar, agite os uniformemente antes de usar, e a loja de volta ao uso 2-8℃after.
2) Não misture reagentes do uso dos jogos diferentes e o no. diferente do lote, impede os reagentes poluído ao usar-se.
3) A carcaça A e a solução da parada podem ter a irritação à pele e os olhos, sejam cuidadosos usar-se.
4) Não expõe a carcaça à luz forte e não evite o contato com o oxidante.
5) O RBV-AG revestiu placas deve ser selado e umidade-prova. Põe a placa não utilizada traseira de MicroWell no saco seco da folha e sele-a no ℃ 2~8.
6) Todos os desperdícios devem ser tratados bem para evitar o pullution antes de rejeitar.
7) A conformidade restrita com as instruções de funcionamento pode obter os melhores resultados. Introduzindo com pipeta a operação, o sincronismo, e o lavagem do processo inteiro devem ser precisos.
8) O RBV-AG revestiu placas é descartável, não repete o uso.

7. Procedimento de teste

1) Para cada teste, grupo 1 bem para o controle positivo e os 2 poços para o controle negativo, controle negativo e controle positivo não precise de diluir-se, para adicionar diretamente a seus poços correspondentes, 100ul/well;
2) Adicione o diluente da amostra nos poços da reação, 80ul/well, a seguir adicione o soro, 20ul/well, sopro e bata-o a mesmo. (Não misture o uso as pontas);
3) Cubra-o com a folha adesiva, ℃ do incubateat 37 por 30 minutos;
4) Abra a folha adesiva, rejeite o líquido do poço, adicione o amortecedor diluído a cada poço, 250ul/well da lavagem, rejeite o líquido, repita a etapa acima por 5 vezes, enfim aleta secar com o papel absorvente;
5) Adicionando o conjugado da enzima, 100ul/well, cobrem-no com a folha adesiva, minutos do ℃ for30 do incubateat 37;
6) Abra a folha adesiva, rejeite o líquido do poço, lavando por 5 vezes como a etapa 4), recorde enfim a aleta secar com o papel absorvente;
7) Adicione a carcaça, 100ul/well, misture-a uniformemente então para cobri-la com a folha adesiva, minutos do ℃in darkfor15 do incubateat 37;
8) Adicione a solução da parada, 50ul/well para parar a reação, meça o resultado em 10 minutos.

8. Julgamento dos resultados

Leia o valor do OD em 450nm (630nm como a referência).
Para que o ensaio seja válido:
Valor do OD do controle negativo (N) > 0,5, entrementes valor positivo (P) taxa de obstrução > 60%
Calcule o método:
PI (taxa de obstrução) = 1 - (a amostra o OD avalia o valor médio do OD do controle negativo)
Resultsinterpretation
PI (taxa de obstrução) > 60%: Positivo
PI (taxa de obstrução) ≤60%: Negativo
(Nota: quando PI=60%, ele significar o titer 0,5 IU/ml do anticorpo)

9. Armazenamento e para expirar data

Loja em 2~8℃ na obscuridade, nenhuma congelada, data de expiração: 12 meses.

Pathogeny

- É causado principalmente pela transmissão do vírus de raiva aos seres humanos através dos animais. O vírus de raiva contém cinco proteínas, a saber glicoproteína (g), nucleoprotein (N), polimerase (L), phosphoprotein (NS) e matriz (M). A glicoproteína do vírus de raiva pode combinar com o acetylcholine, que determina o neuroticismo do vírus de raiva. A fonte de infecção principal é cães doentes, seguidos por gatos doentes e por lobos doentes. Depois que uma pessoa é mordida por um animal doente, o vírus na saliva animal incorpora o corpo humano através da ferida e causa a doença. Alguns pacientes podem igualmente ficar doente porque a conjuntiva é contaminada pela saliva do animal doente.

- Os povos são geralmente susceptíveis à raiva, quando os criadores dos caçadores, do veterinário e os animais forem mais susceptíveis. Depois que o vírus de raiva incorpora o corpo humano, primeiramente contamina as pilhas de músculo, prolifera em uma pequena quantidade nas pilhas de músculo perto da ferida, e invade então os nervos periféricos próximos. Então, o vírus espalha ao nervo central ao longo da linha central do nervo periférico, e não estende ao sangue. Invade principalmente os neurônios na haste e no cerebelo de cérebro. O vírus replicates em uma grande quantidade na matéria cinzenta e alcança a glândula salivar, a córnea, a mucosa nasal, o pulmão, a pele e outras partes ao longo do nervo. O dano principal do vírus de raiva ao anfitrião vem do segundo estômago endoplasmic, que é as partículas eosinophilic formadas pela acumulação de seu escudo rejeitado da proteína na pilha. O segundo estômago endoplasmic é distribuído extensamente nas pilhas nervosas centrais dos pacientes, e é igualmente um indicador do diagnóstico do laboratório da doença.

- Após a infecção, não todos os povos ficarão doente. Aproximadamente 15% - 20% dos povos que são mordidos por cães doentes sem injeção preventiva ficará doente, e aproximadamente 50% - 60% dos povos que são mordidos pelos lobos doentes ficará doente. Os fatores da incidência são relacionados ao local da mordida, ao grau sem fôlego, ao tratamento sem fôlego, à espessura da roupa e à vacinação.

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