Teste suíno Kit Antibody ELISA Diagnostic 192 Wells/jogo PBF da gripe de suínos de PRV Pseudorabies GB

Kit de teste ELISA de anticorpo gB de pseudoraiva suína 192 poços/kit GMP

 

1. Uso

O kit de teste ELISA para anticorpos contra a pseudo-raiva suína (PRV) GreenSpring® é usado para a detecção de anticorpos gB contra a pseudo-raiva suína em soro suíno;avaliação das condições de imunidade contra a Pseudorarábica suína na suinocultura e investigação da epidemiologia da Pseudorarábica suína.Embora o resultado não possa distinguir anticorpo imunológico e anticorpo infeccioso, para confirmar se é anticorpo por vacina ou infecção por vírus selvagem, é necessário combinar dados clínicos, estado imunológico e outros métodos de diagnóstico.

 

2. Princípio

O kit de teste ELISA de anticorpos gB GreenSpring® Porcine Pseudoraraies (PRV) é feito a partir da placa de microtitulação revestida com antígeno (revestida com antígeno PRV) e outros reagentes.Ele aplica o princípio ELISA de fase sólida ao PRV-Ab no soro e, em seguida, adiciona o conjugado enzimático para se ligar especificamente ao complexo de antígeno revestido+PRV-Ab+anticorpo anti-IgG de porco marcado com enzima na microplaca.Com o substrato TMB, ele gerará uma quantidade de cor.A profundidade da cor é relativa ao teor de PRV-Ab, quando o valor da cor é maior que o valor de corte, os porcos estão bem vacinados ou existem infecções naturais.

 

3. Os componentes do kit

 

1	Microplaca revestida com antígeno PRV-gB	96T x 2
2	conjugado enzimático	22ml	tampa amarela
3	Solução diluente de amostra	50ml	tampa transparente
4	Soro de controle negativo PRV-IgG	1,5ml	tampa verde
5	PRV-IgG Soro de controle positivo	1,5ml	tampa vermelha
6	Substrato	12ml X2	tampa laranja
7	Solução de parada	12ml	tampa azul
8	Tampão de lavagem concentrado 20×	50ml	tampa branca
9	Folha adesiva	6 peças
10	Instrução	1 pedaço

 

4. Materiais necessários, mas não fornecidos

1) Leitora de microplacas (comprimento de onda dupla: 450/630 nm).
2) Micropipeta precisa (canal único 1-100ul,0,5-10ul,multicanal 30-300ul)
3) Caixa de temperatura constante ou caixa de banho-maria.
4) Oscilador.
5) Lavadora de microplacas.
6) Pontas descartáveis ​​(10ul, 200ul)
7) Água deionizada

 

5. Requisito de amostra

1) As amostras são de soro suíno, que devem ser coletadas sem bactérias.O tempo de armazenamento deve ser inferior a 1 semana a 2-8 ℃, se for a longo prazo, deve ser mantido a -20 ℃.
2) Evite usar as amostras com hemólise severa, precipitadas, contaminadas por bactérias ou suspensão de proteínas.
3) O EDTA, heparina sódica e outros anticoagulantes não afetarão os resultados.

 

6. Preparação

1) Leve os reagentes ELISA à temperatura ambiente (20-25 ℃) por 30 minutos para obter os melhores resultados.
2) Diluição da amostra: Dilua a amostra com o diluente da amostra 40 vezes. (Haverá mudança de cor após a adição da solução), a amostra diluída precisa ser misturada uniformemente para obter melhores resultados.
3) Preparação da solução de lavagem: Dilua o tampão de lavagem concentrado 20× com água desionizada 20 vezes.

 

7. Procedimento

1) Retire as placas revestidas (podem ser destacadas) e registre a posição da amostra em uma planilha.Defina 2 poços para soro de controle negativo, adicione soro de controle negativo não diluído, 2 poços para soro de controle positivo, adicione soro de controle positivo não diluído, 100μL/poço.Outros são poços de amostra, adicione a amostra diluída, 100μL cada (tanto o teste de poço único quanto o de poço duplo estão OK).
2) Misture suavemente, cubra e incube a 37 ℃ por 30 min.
3) Remova a película adesiva.Despeje o líquido dos poços, adicione o tampão de lavagem diluído em cada poço completamente, despeje diretamente, sem necessidade de ser estático.Repita 3 vezes, na última vez pat para secar em papel absorvente.
4) Adicione 100μL de conjugado enzimático em cada poço.
5) Cubra a placa com uma nova folha adesiva. Incubar a 37 ℃ por 30 min.
6) Repita o passo 3 (lavagem).
7) Adicione 100 ul de substrato em cada poço, misture adequadamente, incube por 10 minutos a 37 ℃ no escuro com uma nova folha adesiva.
8) Adicione 50μL da solução de parada em cada poço, misture delicadamente e determine o resultado.
9) Meça o valor OD de cada poço com um fotômetro no comprimento de onda dupla 450nm/630nm.

 

8. Resultados

Para que o ensaio seja válido, o valor de DO médio dos poços de controle positivo deve ser maior ou igual a 0,6, e o valor de DO médio dos poços de controle negativo é menor que 0,1.Caso contrário, o teste é inválido, precisa ser testado novamente.
O resultado é julgado pelo valor S/P,
S/P=(Amostra OD450/630- NCx(—))/( PCx(—)- NCx(—)), NCx(—) significa valor OD450/630 médio do controle negativo, PCx(—) significa OD450 médio do controle positivo /630 valor
Se S/P≥0,2, é positivo;menor que 0,2, é negativo.

 

9. Interpretação do resultado

1. Hemólise grave, proteína de fibra na separação do soro não é suficiente, contendo eritrócitos, um precipitado, uma amostra com bactérias pode levar a um falso positivo.
2. Podem ocorrer resultados negativos em suínos individuais após as vacinas devido a diferenças individuais ou duração imunológica.
3. Resultados positivos para diagnóstico sorológico e investigação epidemiológica de suínos a serem combinados com outros métodos e dados clínicos.

 

10. Desempenho do produto

1. Especificidade: use este kit para detectar soro de referência, a taxa de adesão chega a 100%.
2. Sensibilidade: pode atingir no máximo 1:5120.
3. Precisão: CV (%) não maior que 8%.
4. Estabilidade: Armazene a 2℃～8℃ por 12 meses ou armazene a 37℃ por 3 dias, o resultado pode atingir os 3 padrões acima.

 

11. Precauções e advertências para usuários

1. Este kit de teste é apenas para uso em pesquisa.n.
2. Não utilize reagentes vencidos, não misture reagentes de lotes diferentes.
3. Leia atentamente o Manual antes de usar.
4. O lixo do experimento deve ser tratado com esterilização a vapor de alta pressão a 121 ℃ por 30 minutos ou tratado com desinfetante de hipoclorito de sódio 5,0 g/L por 30 minutos e depois descartado.
5. A placa MicroWell removida do ambiente refrigerado deve ter umidade equilibrada para secar à temperatura ambiente e, em seguida, pode ser aberta.Coloque de volta a placa MicroWell não utilizada em um saco de alumínio seco e selado a 4 ℃.O reagente líquido não utilizado deve cobrir as tampas, armazenar a 2-8 ℃ no escuro com outros componentes do grupo.
6. Se o tampão de lavagem 20×concentrado parecer cristal, é normal, coloque a 37℃até ser dissolvido.
7. Deve-se usar a micropipeta para adicionar amostra e reagentes, e muitas vezes provar sua precisão.
8. Ao adicionar o tampão de lavagem, deve estar cheio, mas sem transbordar, evitar o aparecimento de enzimas livres na boca do poço ou poluição cruzada entre os poços.
9. A solução Stop é corrosiva, use grande quantidade de água para lavar imediatamente quando tocar na pele ou roupas.

 

Especificações:96 poços×2.
Data de validade: 12 meses.
Armazenamento:Armazene em 2~8℃, no escuro.
Data de produção:Na embalagem externa do kit de teste.

 

 

Epidemiologia do vírus da pseudoraiva suína

O vírus da pseudoraiva é amplamente distribuído no mundo.A pseudo-raiva ocorre naturalmente em suínos, bovinos, ovinos, cães e gatos.Além disso, uma variedade de animais selvagens e carnívoros também são suscetíveis.O vison e o furão também podem causar surtos de pseudo-raiva alimentando-se com vísceras de porco contendo o vírus da pseudo-raiva.Entre os animais experimentais, os coelhos são os mais sensíveis, e camundongos, ratos e porquinhos-da-índia também podem ser infectados.Existem poucos relatos de infecção humana pelo vírus da pseudo-raiva, e nenhum deles é baseado no isolamento do vírus.
Os porcos são os hospedeiros de armazenamento do vírus da pseudo-raiva, e porcos doentes, porcos infectados e camundongos infectados são importantes fontes de infecção da doença.Muitos estudiosos acreditam que a infecção de outros animais está relacionada ao contato com porcos e camundongos.
Em fazendas de suínos, o vírus da pseudo-raiva é transmitido principalmente para suínos saudáveis ​​através da eliminação de suínos infectados.Além disso, o pessoal e os equipamentos contaminados pelo vírus da pseudo-raiva desempenham um papel importante na transmissão.A transmissão aérea é a principal forma de propagação do vírus da pseudo-raiva, mas não está claro até onde ele pode se espalhar.Verificou-se também que o gado pastando em torno de fazendas de porcos onde a pseudo-raiva ocorre nas proximidades também pode adoecer.Neste caso, a transmissão aérea é a única forma possível.Em suínos, o vírus é transmitido principalmente por secreções nasais.Além disso, leite e sêmen também são possíveis formas de transmissão.
Depois de infectados com o vírus da pseudo-raiva, todos os animais, exceto os porcos, morreram.
A pseudo-raiva ocorre sazonalmente, principalmente nas estações frias, mas também em outras estações.

 

 

 

 

 

 

Q1: Quanto tempo vai demorar para você enviar?
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A4: fornecemos serviço pós-venda técnico online profissional.Se o produto falhar durante o experimento, podemos fornecer
orientação individual por telefone, vídeo e outros formulários.

 

Q5: Qual é a sua quantidade mínima de pedido?
A5: 1Kit.

 

Q6: Qual é o método de envio?
A6: Pode ser enviado por expresso (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou por via aérea e terrestre. Confirme conosco antes de fazer um pedido.