Anticorpo ELISA Test Kit One Step 192 Wells/jogos rápidos do virus da gripe dos suínos

Kit de teste ELISA de anticorpo para vírus da gripe suína 96*2 poços/kit ISO9001

1. Princípio

O vírus influenza, referido como vírus influenza, pode ser dividido em três tipos: A, B e C. Entre eles, o vírus influenza A é dividido em muitos subtipos de acordo com diferentes antígenos hemaglutinina H e antígeno neuraminidase N.Atualmente, sabe-se que os vírus influenza A infectam uma variedade de animais, incluindo pássaros, humanos, porcos, cavalos, cães, baleias, etc.
Este kit usa o método ELISA de bloqueio, para detectar o anticorpo do vírus influenza A no soro de vários animais como suínos, pássaros, cães, cavalos etc. Ao testar, adicione uma amostra de soro diluída, após a incubação, se houver anticorpo específico do vírus influenza A, combine com o antígeno pré-revestido, descarte o anticorpo não combinado e outros componentes com lavagem;em seguida, adicione anticorpo monoclonal anti-vírus Influenza A marcado com enzima, anticorpo na amostra bloqueie a combinação de anticorpo monoclonal e antígeno pré-revestido;descartar o conjugado enzimático não combinado com lavagem;Adicione o substrato TMB nos micropoços, o sinal azul da catálise enzimática está na proporção inversa do conteúdo de anticorpo na amostra, use o leitor ELISA no comprimento de onda de 450 nm para medir o valor de absorbância A nos poços de reação após adicionar a solução de parada para parar a reação.

2. Reagentes e conteúdos

3. Material necessário não fornecido

1) Micropipeta: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) Pontas de pipeta descartáveis.
3) Graduação: 500ml.
4) Leitora de Microplacas: 96 poços com comprimento de onda de 450/630nm.
5) Água destilada ou água desionizada.
6) Lavadora de frascos ou Lavadora de microplacas

4. Preparação da amostra

Pegue o sangue total do animal, obtenha o soro usando o método regular, o soro deve ser brilhante e sem hemólise.

5. Preparação do tampão de lavagem

Retorne o tampão de lavagem concentrado 10X à temperatura ambiente antes de usar, se houver cristais de sal, agite para dissolver e depois dilua 10 vezes com água destilada ou água deionizada.O tampão de lavagem diluído pode ser armazenado a 4 ℃ por cerca de 1 semana.

6. Notas

1) Retorne todos os reagentes à temperatura ambiente antes de usar, coloque os reagentes à temperatura ambiente por pelo menos 1 hora.Agite-o uniformemente antes de usar e armazene de volta a 2-8 ℃ após o uso.
2) Não misture reagentes de uso de kits diferentes e nº de lote diferente, evite que os reagentes sejam poluídos durante o uso.
3) O substrato e a solução de parada podem causar irritação na pele e nos olhos, tenha cuidado ao usar.
4) Não exponha o Substrato à luz forte e evite o contato com o oxidante.
5) As placas revestidas com antígeno devem ser seladas e à prova de umidade.Coloque de volta a placa Micro-Well não utilizada em um saco de alumínio seco e selado a 2-8 ℃.
6) Todos os resíduos devem ser bem tratados para evitar a poluição antes do descarte.
7) O cumprimento estrito das instruções de operação pode obter os melhores resultados.A operação de pipetagem, o tempo e a lavagem de todo o processo devem ser precisos.
8) As placas revestidas com antígeno são descartáveis, não repita o uso.

7. Procedimento de teste

1) Pegue a placa revestida com antígeno (a placa pode ser aberta e usada várias vezes de acordo com a quantidade de amostra de cada vez), para cada teste, defina 1 poço para controle positivo e 2 poços para controle negativo, controle positivo e controle negativo não precisa diluir, tomar 100ul diretamente e adicionar em seu poço;
2) Adicione o diluente de amostra aos poços de reação, 60ul/poço, em seguida, adicione a amostra de soro aos poços de reação, 40ul/poço, sopre e misture uniformemente (não misture pontas de uso)
3) Cubra com Folha Adesiva, incube a 37 ℃ por 60 minutos;
4) Abra a película adesiva, descarte o líquido do poço, adicione tampão de lavagem diluído a cada poço, 250ul/poço, depois descarte o líquido, repita o passo acima por 6 vezes, por último aba para secar com o papel absorvente;
5) Adicionando 100ul/poço de Conjugado Enzimático, Cubra com Folha Adesiva, incube a 37℃ por 60 minutos;
6) Abra a película adesiva, descarte o líquido do poço, lavando por 6 vezes conforme passo 4), lembre-se por último aba para secar com o papel absorvente;
7) Adicionar substrato, 100 ul/poço, misturar uniformemente e cobrir com Folha Adesiva, incubar a 37 ℃ no escuro por 10 minutos;
8) Adicione solução de parada 50ul/poço para parar a reação, meça o resultado em 10 minutos.

8. Julgamento dos resultados

Leia o valor OD com o leitor ELISA a 450 nm (630 nm como referência).
Para que o ensaio seja válido:
Controle negativo (N) valor de DO > 0,4;
Método de cálculo:
Valor OD da amostra/valor OD médio do controle negativo = valor S/N
Interpretação dos resultados
Valor S/N ≥ 0,4: Negativo;
Valor S/N＜ 0,4: Positivo.

9. Data de armazenamento e expiração

Armazene a 2 ~ 8 ℃ no escuro, sem congelar, prazo de validade: 12 meses.

Introdução ao Vírus da Gripe Suína

O vírus da influenza suína (Swine Influenza Virus) é um ortomixovírus que pode causar influenza endêmica em suínos.Em 30 de abril de 2009, a Organização Mundial da Saúde renomeou o novo vírus mortal anteriormente conhecido como gripe suína H1N1 influenza A. A gripe suína é uma doença infecciosa respiratória altamente infecciosa dos porcos.É caracterizada por início rápido, febre súbita e outros sintomas de resfriado.A recuperação é tão rápida quanto a ocorrência.A gripe suína é causada por um vírus influenza, que pertence ao mesmo gênero do vírus influenza que infecta os seres humanos.O vírus da doença tem características de co-infecção de humanos e animais.A ocorrência de influenza suína em rebanhos suínos geralmente está relacionada à introdução de novos rebanhos suínos em fazendas de suínos.

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